La leishmaniose viscérale (LV), connue sous le nom de kala-azar dans le sous-continent indien, est une maladie parasitaire causée par le protozoaire flagellé Leishmania, qui peut être mortelle en l'absence de traitement rapide. Le phlébotome Phlebotomus argentipes est le seul vecteur confirmé de la LV en Asie du Sud-Est, où elle est contrôlée par pulvérisation intradomiciliaire d'insecticide à effet rémanent (PID), un insecticide de synthèse. L'utilisation du DDT dans les programmes de lutte contre la LV a entraîné le développement d'une résistance chez les phlébotomes ; le DDT a donc été remplacé par l'alpha-cyperméthrine, un insecticide. Cependant, l'alpha-cyperméthrine agit de manière similaire au DDT, de sorte que le risque de résistance chez les phlébotomes augmente en cas de stress dû à une exposition répétée à cet insecticide. Dans cette étude, nous avons évalué la sensibilité des moustiques sauvages et de leur progéniture F1 à l'aide du bio-essai en flacon des CDC.
Nous avons collecté des moustiques dans dix villages du district de Muzaffarpur, au Bihar, en Inde. Huit villages ont continué d'utiliser des insecticides à haute efficacité.cyperméthrinePour la pulvérisation intérieure, un village a cessé d'utiliser la cyperméthrine à forte concentration, et un autre village n'a jamais utilisé la cyperméthrine à forte concentration. Les moustiques collectés ont été exposés à une dose diagnostique prédéfinie pendant une durée définie (3 μg/ml pendant 40 min), et le taux d'élimination et la mortalité ont été enregistrés 24 h après l'exposition.
Les taux de mortalité des moustiques sauvages variaient de 91,19 % à 99,47 %, et ceux de leurs générations F1 de 91,70 % à 98,89 %. Vingt-quatre heures après l'exposition, la mortalité des moustiques sauvages variait de 89,34 % à 98,93 %, et celle de leur génération F1 de 90,16 % à 98,33 %.
Les résultats de cette étude indiquent qu’une résistance peut se développer chez P. argentipes, ce qui souligne la nécessité d’une surveillance et d’une vigilance continues pour maintenir le contrôle une fois l’éradication réalisée.
La leishmaniose viscérale (LV), connue sous le nom de kala-azar dans le sous-continent indien, est une maladie parasitaire causée par le protozoaire flagellé Leishmania et transmise par la piqûre de phlébotomes femelles infectés (Diptera : Myrmecophaga). Les phlébotomes sont le seul vecteur confirmé de la LV en Asie du Sud-Est. L'Inde est sur le point d'éliminer la LV. Cependant, pour maintenir de faibles taux d'incidence après l'éradication, il est essentiel de réduire la population de vecteurs afin de prévenir une éventuelle transmission.
En Asie du Sud-Est, la lutte contre les moustiques se fait par pulvérisation intradomiciliaire d'insecticides de synthèse. Le comportement secret et dormant des pattes argentées en fait une cible idéale pour la lutte antiparasitaire par pulvérisation intradomiciliaire [1]. La pulvérisation intradomiciliaire de dichlorodiphényltrichloroéthane (DDT) dans le cadre du Programme national de lutte contre le paludisme en Inde a eu des répercussions importantes sur le contrôle des populations de moustiques et la réduction significative des cas de LV [2]. Cette lutte non planifiée contre la LV a incité le Programme indien d'éradication de la LV à adopter la pulvérisation intradomiciliaire comme principale méthode de lutte contre les pattes argentées. En 2005, les gouvernements de l'Inde, du Bangladesh et du Népal ont signé un protocole d'accord visant à éliminer la LV d'ici 2015 [3]. Les efforts d'éradication, combinant lutte antivectorielle et diagnostic et traitement rapides des cas humains, visaient à entrer dans la phase de consolidation d'ici 2015, un objectif ensuite révisé à 2017, puis à 2020. [4] La nouvelle feuille de route mondiale pour éliminer les maladies tropicales négligées comprend l’élimination de la LV d’ici 2030.[5]
Alors que l'Inde entre dans la phase post-éradication du BCVD, il est impératif de veiller à ce qu'une résistance significative à la bêta-cyperméthrine ne se développe pas. La raison de cette résistance est que le DDT et la cyperméthrine ont le même mécanisme d'action, à savoir qu'ils ciblent la protéine VGSC[21]. Ainsi, le risque de développement d'une résistance chez les phlébotomes peut être accru par le stress causé par une exposition régulière à une cyperméthrine très puissante. Il est donc impératif de surveiller et d'identifier les populations potentielles de phlébotomes résistantes à cet insecticide. Dans ce contexte, l'objectif de cette étude était de surveiller l'état de sensibilité des phlébotomes sauvages à l'aide de doses diagnostiques et de durées d'exposition déterminées par Chaubey et al. [20] ont étudié P. argentipes dans différents villages du district de Muzaffarpur au Bihar, en Inde, qui utilisaient en continu des systèmes de pulvérisation intérieure traités à la cyperméthrine (villages IPS continus). L'état de sensibilité des P. argentipes sauvages des villages qui avaient cessé d'utiliser des systèmes de pulvérisation intérieure traités à la cyperméthrine (anciens villages IPS) et ceux qui n'avaient jamais utilisé de systèmes de pulvérisation intérieure traités à la cyperméthrine (villages non IPS) ont été comparés à l'aide du bio-essai en bouteille du CDC.
Dix villages ont été sélectionnés pour l'étude (Fig. 1 ; Tableau 1), dont huit avaient des antécédents de pulvérisation intérieure continue de pyréthroïdes de synthèse (hyperméthrine ; désignés comme villages à hyperméthrine continue) et avaient eu des cas de LV (au moins un cas) au cours des trois dernières années. Parmi les deux villages restants de l'étude, un village qui n'avait pas mis en œuvre la pulvérisation intérieure de bêta-cyperméthrine (village sans pulvérisation intérieure) a été sélectionné comme village témoin et l'autre village qui pratiquait une pulvérisation intérieure intermittente de bêta-cyperméthrine (village à pulvérisation intérieure intermittente/ancien village à pulvérisation intérieure) a été sélectionné comme village témoin. La sélection de ces villages s'est basée sur la coordination avec le département de la santé et l'équipe de pulvérisation intérieure et sur la validation du micro-plan d'action pour la pulvérisation intérieure dans le district de Muzaffarpur.
Carte géographique du district de Muzaffarpur indiquant l'emplacement des villages étudiés (1 à 10). Lieux d'étude : 1, Manifulkaha ; 2, Ramdas Majhauli ; 3, Madhubani ; 4, Anandpur Haruni ; 5, Pandey ; 6, Hirapur ; 7, Madhopur Hazari ; 8, Hamidpur ; 9, Noonfara ; 10, Simara. La carte a été réalisée à l'aide du logiciel QGIS (version 3.30.3) et du fichier Shapefile d'évaluation ouverte.
Français Les bouteilles pour les expériences d'exposition ont été préparées selon les méthodes de Chaubey et al. [20] et Denlinger et al. [22]. Brièvement, des bouteilles en verre de 500 mL ont été préparées un jour avant l'expérience et la paroi intérieure des bouteilles a été enduite de l'insecticide indiqué (la dose diagnostique d'α-cyperméthrine était de 3 μg/mL) en appliquant une solution acétonique de l'insecticide (2,0 mL) sur le fond, les parois et le bouchon des bouteilles. Chaque bouteille a ensuite été séchée sur un rouleau mécanique pendant 30 min. Pendant ce temps, dévissez lentement le bouchon pour permettre à l'acétone de s'évaporer. Après 30 min de séchage, retirez le bouchon et faites tourner la bouteille jusqu'à ce que toute l'acétone se soit évaporée. Les bouteilles ont ensuite été laissées ouvertes pour sécher pendant la nuit. Pour chaque test répété, une bouteille, utilisée comme témoin, a été enduite de 2,0 mL d'acétone. Toutes les bouteilles ont été réutilisées tout au long des expériences après un nettoyage approprié selon la procédure décrite par Denlinger et al. et l’Organisation mondiale de la santé [ 22 , 23 ].
Le lendemain de la préparation de l'insecticide, 30 à 40 moustiques sauvages (femelles affamées) ont été retirés des cages et placés dans des flacons, puis soufflés délicatement dans chaque flacon. Un nombre approximativement identique de mouches a été utilisé pour chaque flacon imprégné d'insecticide, y compris le témoin. Répétez cette opération au moins cinq à six fois dans chaque village. Après 40 minutes d'exposition à l'insecticide, le nombre de mouches abattues a été enregistré. Toutes les mouches ont été capturées à l'aide d'un aspirateur mécanique, placées dans des boîtes en carton d'une pinte recouvertes d'un grillage fin, puis placées dans un incubateur séparé, aux mêmes conditions d'humidité et de température, avec la même source de nourriture (boules de coton imbibées d'une solution sucrée à 30 %) que les colonies non traitées. La mortalité a été enregistrée 24 heures après l'exposition à l'insecticide. Tous les moustiques ont été disséqués et examinés afin de confirmer l'identité de l'espèce. La même procédure a été réalisée avec les mouches descendantes F1. Les taux d'abattage et de mortalité ont été enregistrés 24 heures après l'exposition. Si la mortalité dans les flacons témoins était < 5 %, aucune correction de mortalité n'était effectuée dans les réplicats. Si la mortalité dans le flacon témoin était ≥ 5 % et ≤ 20 %, la mortalité dans les flacons d'essai de ce réplicat était corrigée à l'aide de la formule d'Abbott. Si la mortalité dans le groupe témoin dépassait 20 %, l'ensemble du groupe d'essai était éliminé [24, 25, 26].
Mortalité moyenne des moustiques P. argentipes capturés dans la nature. Les barres d'erreur représentent les erreurs types de la moyenne. L'intersection des deux lignes horizontales rouges avec le graphique (mortalité de 90 % et 98 %, respectivement) indique la fenêtre de mortalité dans laquelle une résistance peut se développer.[25]
Mortalité moyenne de la descendance F1 de P. argentipes capturés dans la nature. Les barres d'erreur représentent les erreurs types de la moyenne. Les courbes coupées par les deux lignes horizontales rouges (mortalité de 90 % et 98 %, respectivement) représentent la fourchette de mortalité au-delà de laquelle une résistance peut se développer[25].
Les moustiques du village témoin (Manifulkaha) se sont révélés très sensibles aux insecticides. La mortalité moyenne (± ET) des moustiques capturés dans la nature 24 h après l'inactivation et l'exposition était respectivement de 99,47 ± 0,52 % et 98,93 ± 0,65 %, et la mortalité moyenne des descendants F1 était respectivement de 98,89 ± 1,11 % et 98,33 ± 1,11 % (tableaux 2 et 3).
Les résultats de cette étude indiquent que les phlébotomes à pattes argentées pourraient développer une résistance à l'α-cyperméthrine, un pyréthroïde synthétique (SP), dans les villages où ce pyréthroïde (SP) était utilisé systématiquement. En revanche, les phlébotomes à pattes argentées collectés dans les villages non couverts par le programme de lutte antiparasitaire intradomiciliaire (IRS) se sont révélés très sensibles. Le suivi de la sensibilité des populations de phlébotomes sauvages est important pour contrôler l'efficacité des insecticides utilisés, car cette information peut aider à gérer la résistance aux insecticides. Des niveaux élevés de résistance au DDT ont été régulièrement signalés chez les phlébotomes des zones endémiques du Bihar en raison de la pression sélective historique exercée par l'IRS utilisant cet insecticide [ 1 ].
Français Nous avons constaté que P. argentipes était très sensible aux pyréthroïdes, et des essais sur le terrain en Inde, au Bangladesh et au Népal ont montré que l'IRS avait une efficacité entomologique élevée lorsqu'il était utilisé en combinaison avec la cyperméthrine ou la deltaméthrine [19, 26, 27, 28, 29]. Récemment, Roy et al. [18] ont rapporté que P. argentipes avait développé une résistance aux pyréthroïdes au Népal. Notre étude de sensibilité sur le terrain a montré que les phlébotomes à pattes argentées collectés dans des villages non exposés à l'IRS étaient très sensibles, mais les mouches collectées dans des villages à IRS intermittents/anciens et à IRS continus (la mortalité variait de 90 % à 97 %, à l'exception des phlébotomes d'Anandpur-Haruni qui avaient une mortalité de 89,34 % à 24 heures après l'exposition) étaient probablement résistantes à la cyperméthrine très efficace [25]. Français Une raison possible du développement de cette résistance est la pression exercée par la pulvérisation de routine intérieure (IRS) et les programmes de pulvérisation locale basés sur des cas, qui sont des procédures standard pour la gestion des épidémies de kala-azar dans les zones/blocs/villages endémiques (Procédure opérationnelle standard pour l'enquête et la gestion des épidémies [30]. Les résultats de cette étude fournissent des indications précoces du développement d'une pression sélective contre la cyperméthrine, très efficace. Malheureusement, les données historiques de sensibilité pour cette région, obtenues à l'aide du bio-essai en bouteille du CDC, ne sont pas disponibles pour comparaison ; toutes les études précédentes ont surveillé la sensibilité de P. argentipes à l'aide de papier imprégné d'insecticide de l'OMS. Les doses diagnostiques d'insecticides dans les bandelettes de test de l'OMS sont les concentrations d'identification recommandées d'insecticides à utiliser contre les vecteurs du paludisme (Anopheles gambiae), et l'applicabilité opérationnelle de ces concentrations aux phlébotomes n'est pas claire car les phlébotomes volent moins fréquemment que les moustiques et passent plus de temps en contact avec le substrat dans le bio-essai [23].
Français Les pyréthroïdes synthétiques sont utilisés dans les zones endémiques de LV au Népal depuis 1992, en alternance avec les SP alpha-cyperméthrine et lambda-cyhalothrine pour lutter contre les phlébotomes [31], et la deltaméthrine est également utilisée au Bangladesh depuis 2012 [32]. Une résistance phénotypique a été détectée dans les populations sauvages de phlébotomes à pattes argentées dans les zones où les pyréthroïdes synthétiques sont utilisés depuis longtemps [ 18 , 33 , 34 ]. Une mutation non synonyme (L1014F) a été détectée dans les populations sauvages du phlébotome indien et a été associée à la résistance au DDT, suggérant que la résistance aux pyréthroïdes apparaît au niveau moléculaire, car le DDT et le pyréthroïde (alpha-cyperméthrine) ciblent le même gène dans le système nerveux de l'insecte [17, 34]. Par conséquent, une évaluation systématique de la sensibilité à la cyperméthrine et une surveillance de la résistance des moustiques sont essentielles pendant les périodes d’éradication et de post-éradication.
Une limite potentielle de cette étude est que nous avons utilisé le test biologique en flacon des CDC pour mesurer la sensibilité, mais toutes les comparaisons ont utilisé les résultats d'études antérieures utilisant le kit de test biologique de l'OMS. Les résultats des deux tests biologiques peuvent ne pas être directement comparables car le test biologique en flacon des CDC mesure l'inactivation à la fin de la période de diagnostic, tandis que le test biologique en kit de l'OMS mesure la mortalité à 24 ou 72 heures après l'exposition (ce dernier pour les composés à action lente) [35]. Une autre limite potentielle est le nombre de villages PID dans cette étude par rapport à un village non PID et à un village non PID/ancien PID. Nous ne pouvons pas supposer que le niveau de sensibilité des moustiques vecteurs observé dans les villages individuels d'un district soit représentatif du niveau de sensibilité dans d'autres villages et districts du Bihar. Alors que l'Inde entre dans la phase post-élimination du virus de la leucémie, il est impératif de prévenir le développement significatif d'une résistance. Une surveillance rapide de la résistance des populations de phlébotomes de différents districts, blocs et zones géographiques est nécessaire. Les données présentées dans cette étude sont préliminaires et doivent être vérifiées par comparaison avec les concentrations d'identification publiées par l'Organisation mondiale de la santé [35] pour avoir une idée plus précise de l'état de sensibilité de P. argentipes dans ces zones avant de modifier les programmes de lutte antivectorielle pour maintenir de faibles populations de phlébotomes et soutenir l'élimination du virus de la leucémie.
Le moustique P. argentipes, vecteur du virus de la leucose, pourrait commencer à montrer des signes précoces de résistance à la cyperméthrine, une substance très efficace. Une surveillance régulière de la résistance aux insecticides dans les populations sauvages de P. argentipes est nécessaire pour maintenir l'impact épidémiologique des interventions de lutte antivectorielle. La rotation d'insecticides à modes d'action différents et/ou l'évaluation et l'homologation de nouveaux insecticides sont nécessaires et recommandées pour gérer la résistance aux insecticides et favoriser l'élimination du virus de la leucose en Inde.
Date de publication : 17 février 2025