Une série d'essais pilotes en huttes ont été menés à Khowe, dans le sud du Bénin, afin d'évaluer l'efficacité biologique de moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) de nouvelle génération et de MII ayant déjà fait leurs preuves sur le terrain, contre les vecteurs du paludisme résistants aux pyréthrines. Les MII ayant déjà été utilisées sur le terrain ont été retirées des ménages après 12, 24 et 36 mois. Des fragments de toile prélevés sur des MII entières ont été analysés afin de déterminer leur composition chimique, et des bioessais de sensibilité ont été réalisés au cours de chaque essai pour évaluer l'évolution de la résistance aux insecticides au sein de la population de vecteurs de Khowe.
Interceptor® G2 a surpassé les autres moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII), confirmant la supériorité des moustiquaires à base de pyréthroïdes et de chlorfénapyr par rapport aux autres types de moustiquaires. Parmi les nouveaux produits, toutes les MII de nouvelle génération ont démontré une meilleure bioefficacité qu'Interceptor® ; cependant, l'ampleur de cette amélioration s'est atténuée après vieillissement sur le terrain en raison de la plus faible durabilité des composés non pyréthroïdes. Ces résultats soulignent la nécessité d'améliorer la persistance de l'effet insecticide des MII de nouvelle génération.
InsecticideLes moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) ont joué un rôle crucial dans la réduction de la morbidité et de la mortalité liées au paludisme au cours des 20 dernières années. Depuis 2004, plus de 3 milliards de MII ont été distribuées dans le monde, et des études de modélisation suggèrent que 68 % des cas de paludisme en Afrique subsaharienne ont été évités entre 2000 et 2015. Malheureusement, la résistance des populations de vecteurs du paludisme aux pyréthroïdes (la classe d'insecticides standard utilisée dans les MII) a considérablement augmenté, menaçant l'efficacité de cette intervention essentielle. Parallèlement, les progrès dans la lutte contre le paludisme ont ralenti à l'échelle mondiale, et plusieurs pays fortement touchés connaissent une augmentation du nombre de cas de paludisme depuis 2015. Ces tendances ont favorisé le développement d'une nouvelle génération de MII innovantes, conçues pour contrer la menace de la résistance aux pyréthroïdes et contribuer à réduire la charge de morbidité et à atteindre les objectifs mondiaux ambitieux fixés.
Il existe actuellement sur le marché trois moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) de nouvelle génération, chacune associant un pyréthroïde à un autre insecticide ou synergiste capable de contrer la résistance aux pyréthroïdes chez les vecteurs du paludisme. Ces dernières années, plusieurs essais contrôlés randomisés en grappes (ECR) ont été menés afin d'évaluer l'efficacité épidémiologique de ces moustiquaires par rapport aux moustiquaires standard contenant uniquement des pyréthroïdes et de fournir les données nécessaires à l'appui des recommandations de l'Organisation mondiale de la Santé (OMS). Les moustiquaires associant des pyréthroïdes au butoxyde de pipéronyle (PBO), un synergiste qui renforce l'efficacité des pyréthroïdes en inhibant les enzymes de détoxification des moustiques, ont été les premières recommandées par l'OMS après que deux produits (Olyset® Plus et PermaNet® 3.0) ont démontré une efficacité épidémiologique supérieure à celle des moustiquaires contenant uniquement des pyréthroïdes lors d'essais contrôlés randomisés en grappes menés en Tanzanie et en Ouganda. Cependant, davantage de données sont nécessaires pour déterminer la valeur en matière de santé publique des moustiquaires imprégnées de pyréthroïdes et de PBO en Afrique de l’Ouest, où une forte résistance aux pyréthroïdes peut réduire leurs avantages par rapport aux moustiquaires imprégnées uniquement de pyréthroïdes.
La persistance de l'effet insecticide des moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) est généralement évaluée par la collecte périodique de moustiquaires auprès des communautés et leur analyse lors de bioessais en laboratoire utilisant des souches de moustiques élevées en captivité. Bien que ces essais soient utiles pour caractériser la biodisponibilité et l'efficacité des insecticides à la surface des moustiquaires au fil du temps, ils fournissent des informations limitées sur l'efficacité comparative des différents types de moustiquaires de nouvelle génération, car les méthodes et les souches de moustiques utilisées doivent être adaptées au mode d'action des insecticides qu'elles contiennent. Le test en hutte expérimentale constitue une approche alternative permettant d'évaluer comparativement l'efficacité des moustiquaires imprégnées d'insecticide dans des études de durabilité, dans des conditions mimant les interactions naturelles entre les moustiques sauvages et les moustiquaires domestiques lors de leur utilisation. En effet, des études de modélisation récentes, utilisant des indicateurs entomologiques pour les données épidémiologiques, ont montré que la mortalité et les taux d'alimentation des moustiques mesurés lors de ces essais peuvent être utilisés pour prédire l'impact des MII sur l'incidence et la prévalence du paludisme dans les essais contrôlés randomisés en grappes. Ainsi, les essais expérimentaux en cabane dans lesquels des ganglions lymphatiques traités aux insecticides et collectés sur le terrain sont inclus dans des ECR en grappes peuvent fournir des données précieuses sur la bioefficacité comparative et la persistance insecticide des ganglions lymphatiques traités aux insecticides au cours de leur durée de vie prévue, et aider à interpréter les résultats épidémiologiques de ces études.
Le test en cabane expérimentale est une simulation d'habitat humain standardisée, recommandée par l'Organisation mondiale de la Santé pour évaluer l'efficacité des moustiquaires imprégnées d'insecticide. Ces tests reproduisent les conditions d'exposition réelles auxquelles les moustiques sont exposés lorsqu'ils interagissent avec les moustiquaires domestiques et constituent donc une approche particulièrement pertinente pour évaluer l'efficacité biologique des moustiquaires usagées tout au long de leur durée de vie prévue.
Cette étude a évalué l'efficacité entomologique de trois types différents de moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération (PermaNet® 3.0, Royal Guard® et Interceptor® G2) en conditions réelles, dans des bâtiments d'élevage expérimentaux, et l'a comparée à celle d'une moustiquaire standard imprégnée uniquement de pyréthrine (Interceptor®). Toutes ces moustiquaires sont préqualifiées par l'OMS pour la lutte antivectorielle. Leurs caractéristiques détaillées sont présentées ci-dessous :
En mars 2020, une campagne de distribution à grande échelle de moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) a été menée dans des villages de huttes du département de Zou, au sud du Bénin, dans le cadre d'essais pilotes. Des moustiquaires Interceptor®, Royal Guard® et Interceptor® G2 ont été sélectionnées aléatoirement dans les communes de Kove, Zagnanado et Ouinhi, pour une étude observationnelle de durabilité intégrée à un essai contrôlé randomisé (ECR) par grappes, afin d'évaluer l'efficacité épidémiologique des MII à double insecticide. Des moustiquaires PermaNet® 3.0 ont été collectées dans le village d'Avokanzun, près des communes de Jija et Bohicon (7°20′ N, 1°56′ E), et distribuées simultanément avec les moustiquaires des grappes de l'ECR lors de la campagne de masse 2020 du Programme national de lutte contre le paludisme. La figure 1 illustre la localisation des grappes/villages où les différents types de MII ont été collectés par rapport aux sites des huttes expérimentales.
Un essai pilote en cabane a été mené afin de comparer les performances entomologiques des moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® et Interceptor® G2, retirées des ménages 12, 24 et 36 mois après leur distribution. À chaque échéance annuelle, les performances des MII usagées sur le terrain ont été comparées à celles de moustiquaires neuves de chaque type et à celles de moustiquaires non traitées (témoin négatif). À chaque échéance annuelle, un total de 54 échantillons de MII usagées sur le terrain et 6 MII neuves de chaque type ont été testés dans 1 ou 2 essais en cabane, avec une rotation quotidienne des traitements. Avant chaque essai, l'indice de porosité moyen des moustiquaires usagées de chaque type a été mesuré conformément aux recommandations de l'OMS. Afin de simuler l'usure liée à une utilisation quotidienne, toutes les MII neuves et les moustiquaires témoins non traitées ont été perforées de six trous de 4 x 4 cm : deux sur chaque grand côté et un sur chaque petit côté, conformément aux recommandations de l'OMS. La moustiquaire a été installée à l'intérieur de la hutte en fixant les bords des tôles du toit à des clous situés dans les angles supérieurs des murs à l'aide de cordes. Les traitements suivants ont été évalués dans chaque essai :
Des moustiquaires ayant déjà servi sur le terrain ont été évaluées dans des cabanes expérimentales la même année que leur retrait. Des essais en cabanes ont été menés sur le même site de mai à septembre 2021, d'avril à juin 2022 et de mai à juillet 2023, les moustiquaires étant retirées après respectivement 12, 24 et 36 mois. Chaque essai a duré un cycle de traitement complet (54 nuits sur 9 semaines), sauf pour l'essai de 12 mois, où deux cycles consécutifs ont été réalisés afin d'accroître la taille de l'échantillon de moustiques. Selon un plan en carré latin, les traitements ont été alternés chaque semaine entre les cabanes expérimentales afin de contrôler l'effet de l'emplacement des cabanes, tandis que les volontaires ont été changés quotidiennement afin de contrôler les différences d'attractivité des moustiques pour les différents hôtes. Les moustiques ont été collectés 6 jours par semaine ; le 7e jour, avant le cycle de rotation suivant, les cabanes ont été nettoyées et aérées pour prévenir toute infestation.
Les principaux critères d’évaluation de l’efficacité du traitement expérimental en hutte contre les moustiques Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes et la comparaison de la moustiquaire imprégnée d’insecticide de nouvelle génération avec la moustiquaire Interceptor® contenant uniquement des pyréthroïdes étaient les suivants :
Les critères d’évaluation secondaires de l’efficacité du traitement expérimental en hutte contre les moustiques Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes étaient les suivants :
Taux de confinement (%) – réduction du taux d’entrée dans le groupe traité par rapport au groupe non traité. Le calcul est le suivant :
où Tu représente le nombre de moustiques inclus dans le groupe témoin non traité, et Tt représente le nombre de moustiques inclus dans le groupe traité.
Taux de désabonnement (%) – Taux de désabonnement dû à une irritation potentielle due au traitement, exprimé en proportion de moustiques collectés sur le balcon.
Le coefficient de suppression de la piqûre (%) correspond à la réduction de la proportion de moustiques piqueurs dans le groupe traité par rapport au groupe témoin non traité. Le calcul est le suivant : où Bfu représente la proportion de moustiques piqueurs dans le groupe témoin non traité et Bft la proportion de moustiques piqueurs dans le groupe traité.
Réduction de la fertilité (%) — diminution de la proportion de moustiques fertiles dans le groupe traité par rapport au groupe témoin non traité. La méthode de calcul est la suivante : où Fu représente la proportion de moustiques fertiles dans le groupe témoin non traité et Ft la proportion de moustiques fertiles dans le groupe traité.
Afin de suivre l’évolution du profil de résistance des populations de moustiques vecteurs de Covè, l’OMS a mené des bioessais in vitro et en flacons la même année que chaque essai en hutte expérimentale (2021, 2022, 2023) pour évaluer la sensibilité aux insecticides à action directe (IAD) dans les moustiquaires imprégnées d’insecticide (MII) étudiées et faciliter l’interprétation des résultats. Dans les études in vitro, les moustiques ont été exposés à des papiers filtres traités avec des concentrations définies d’alpha-cyperméthrine (0,05 %) et de deltaméthrine (0,05 %), ainsi qu’à des flacons enduits de concentrations définies de CFP (100 µg/flacon) et de PPF (100 µg/flacon) afin d’évaluer leur sensibilité à ces insecticides. L’intensité de la résistance aux pyréthroïdes a été étudiée en exposant les moustiques à des concentrations différentielles d’alpha-cyperméthrine et de deltaméthrine multipliées par 5 (0,25 %) et par 10 (0,50 %). Enfin, la contribution de la synergie PBO et de la surexpression de la monooxygénase cytochrome P450 (P450) à la résistance aux pyréthroïdes a été évaluée en préexposant les moustiques à différentes concentrations d'α-cyperméthrine (0,05 %) et de deltaméthrine (0,05 %), ainsi qu'à une préexposition au PBO (4 %). Le papier filtre utilisé pour le test en tube de l'OMS a été acheté auprès de l'Universiti Sains Malaysia. Les flacons de test de bioessai de l'OMS utilisant le CFP et le PPF ont été préparés conformément aux recommandations de l'OMS.
Les moustiques utilisés pour les bioessais ont été collectés au stade larvaire dans des gîtes larvaires proches des huttes expérimentales, puis élevés jusqu'à l'âge adulte. À chaque point de mesure, au moins 100 moustiques ont été exposés à chaque traitement pendant 60 minutes, avec 4 répétitions par tube/flacon et environ 25 moustiques par tube/flacon. Pour les expositions aux pyréthroïdes et au CFP, des moustiques âgés de 3 à 5 jours et n'ayant pas encore pris de repas ont été utilisés, tandis que pour le PPF, des moustiques hématophages âgés de 5 à 7 jours ont été utilisés afin de stimuler l'ovogenèse et d'évaluer l'effet du PPF sur la reproduction des moustiques. Des expositions parallèles ont été réalisées avec du papier filtre imprégné d'huile de silicone, du PBO pur (4 %) et des flacons enduits d'acétone comme témoins. À la fin de l'exposition, les moustiques ont été transférés dans des récipients non traités et exposés à du coton imbibé d'une solution de glucose à 10 % (p/v). La mortalité a été enregistrée 24 heures après l'exposition aux pyréthroïdes et toutes les 24 heures pendant 72 heures après les expositions au CFP et au PPF. Pour évaluer la sensibilité au PPF, les moustiques exposés au PPF ayant survécu, ainsi que les témoins négatifs correspondants, ont été disséqués après constatation de la mortalité différée. Le développement ovarien a été observé au microscope optique et la fertilité a été évaluée selon la classification de Christopher [28, 30]. Si les œufs atteignaient le stade V de Christopher, les moustiques étaient considérés comme fertiles ; dans le cas contraire, aux stades I à IV, les moustiques étaient considérés comme stériles.
À chaque étape de l'année, des morceaux de 30 × 30 cm ont été découpés dans des filets neufs et usagés, aux emplacements spécifiés dans les recommandations de l'OMS [22]. Après découpe, les filets ont été étiquetés, enveloppés dans du papier aluminium et conservés au réfrigérateur à 4 ± 2 °C afin d'empêcher la migration des substances actives dans le tissu. Ils ont ensuite été envoyés au Centre wallon de recherche agricole (CARE), en Belgique, pour une analyse chimique visant à mesurer les variations de la teneur totale en substances actives au cours de leur durée de vie. Les méthodes analytiques utilisées (inspirées des méthodes recommandées par le Comité coopératif international pour l'analyse des pesticides) ont été décrites précédemment [25, 31].
Pour les données des essais en cabanes expérimentales, le nombre total de moustiques vivants/morts, piqueurs/non piqueurs et fertiles/stériles dans les différents compartiments des cabanes a été additionné pour chaque traitement et chaque essai afin de calculer les différents résultats proportionnels (mortalité à 72 heures, piqûres, ectoparasitisme, piégeage dans la moustiquaire, fertilité) et leurs intervalles de confiance à 95 %. Les différences entre les traitements pour ces résultats binaires proportionnels ont été analysées par régression logistique, tandis que les différences pour les résultats de comptage ont été analysées par régression binomiale négative. Étant donné que deux cycles de rotation des traitements ont été menés tous les 12 mois et que certains traitements ont été testés dans plusieurs essais, les analyses de pénétration des moustiques ont été ajustées en fonction du nombre de jours de test de chaque traitement. La nouvelle moustiquaire imprégnée d'insecticide (MII) pour chaque résultat a également été analysée afin d'obtenir une estimation unique pour tous les points de mesure. Outre la principale variable explicative du traitement, chaque modèle incluait la cabane, le dormeur, la période d'essai, l'indice d'ouverture de la MII et le jour comme effets fixes afin de contrôler la variation due aux différences d'attractivité des dormeurs et des cabanes, à la saisonnalité, au statut de la moustiquaire et à la dispersion excessive. Les analyses de régression ont permis de calculer les odds ratios ajustés (OR) et leurs intervalles de confiance à 95 % afin d'estimer l'effet de la moustiquaire imprégnée d'insecticide de nouvelle génération (MII-N) par rapport à la moustiquaire imprégnée uniquement de pyréthroïdes, Interceptor®, sur les critères d'évaluation principaux que sont la mortalité et la fécondité des moustiques. Les valeurs p issues des modèles ont également été utilisées pour attribuer des lettres courtes indiquant la significativité statistique au seuil de 5 % pour toutes les comparaisons deux à deux des critères d'évaluation principaux et secondaires. Toutes les analyses de régression ont été réalisées avec le logiciel Stata version 18.
La sensibilité des populations de vecteurs Covese a été interprétée en fonction de la mortalité et de la fécondité observées in vitro et par bioessais en flacon, conformément aux recommandations de l'Organisation mondiale de la Santé. Les résultats des analyses chimiques ont permis de déterminer la teneur totale en antioxydants (AI) dans les fragments de moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII), utilisée pour calculer le taux de rétention d'AI dans les moustiquaires usagées par rapport aux moustiquaires neuves à chaque point de mesure chaque année. Toutes les données ont été enregistrées manuellement sur des formulaires standardisés, puis saisies deux fois dans une base de données Microsoft Excel.
Les comités d'éthique du ministère de la Santé du Bénin (n° 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), de la London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (n° 16237) et de l'Organisation mondiale de la Santé (n° ERC.0003153) ont approuvé la réalisation d'un essai pilote en milieu clos impliquant des volontaires. Un consentement éclairé écrit a été obtenu de chaque volontaire avant sa participation à l'étude. Tous les volontaires ont reçu une chimioprophylaxie gratuite afin de réduire le risque de paludisme, et une infirmière était présente tout au long de l'essai pour examiner tout volontaire présentant des symptômes de fièvre ou une réaction indésirable au produit testé.
Les résultats complets des huttes expérimentales, résumant le nombre total de moustiques vivants/morts, affamés/nourris de sang et fertiles/stériles pour chaque groupe expérimental, ainsi que les statistiques descriptives sont présentés en tant que matériel supplémentaire (Tableau S1).
Dans une hutte expérimentale à Kowa, au Bénin, la prise de sang de moustiques Anopheles gambiae sauvages résistants aux pyréthroïdes a été réduite. Les données issues des groupes témoins non traités et des moustiquaires testées ont été regroupées pour obtenir une estimation unique de l'efficacité. L'analyse de régression logistique a montré que les colonnes partageant la même lettre ne présentaient pas de différence significative au seuil de 5 % (p > 0,05). Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Mortalité des moustiques Anopheles gambiae sauvages résistants aux pyréthroïdes pénétrant dans une hutte expérimentale à Kowa, au Bénin. Les données des groupes témoins non traités et des moustiquaires testées ont été regroupées pour obtenir une estimation unique de l'efficacité. L'analyse de régression logistique a montré que les colonnes partageant la même lettre ne présentaient pas de différence significative au seuil de 5 % (p > 0,05). Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Le rapport de cotes décrit la différence de mortalité observée avec les moustiquaires de nouvelle génération par rapport aux moustiquaires imprégnées uniquement de pyréthroïdes. La ligne pointillée représente un rapport de cotes de 1, indiquant l'absence de différence de mortalité. Un rapport de cotes supérieur à 1 indique une mortalité plus élevée avec les moustiquaires de nouvelle génération. Les données relatives aux moustiquaires de nouvelle génération ont été regroupées à partir de différents essais afin d'obtenir une estimation unique de leur efficacité. Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Bien qu'Interceptor® ait démontré la mortalité la plus faible parmi toutes les moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) testées, le vieillissement sur le terrain n'a pas eu d'impact négatif sur son effet sur la mortalité des vecteurs. En effet, les moustiquaires Interceptor® neuves ont entraîné une mortalité de 12 %, tandis que les moustiquaires ayant vieilli sur le terrain ont montré une légère amélioration à 12 mois (17 %, p = 0,006) et à 24 mois (17 %, p = 0,004), avant de revenir à des niveaux similaires à ceux des moustiquaires neuves à 36 mois (11 %, p = 0,05). En revanche, les taux de mortalité pour la génération suivante de moustiquaires imprégnées d'insecticide ont diminué progressivement au fil du temps après leur déploiement. La réduction était la plus marquée avec Interceptor® G2, où la mortalité est passée de 58 % avec les nouvelles mailles à 36 % à 12 mois (p < 0,001).< 0,001), 31 % à 24 mois (p< 0,001), et 20 % à 36 mois (p< 0,001). Le nouveau PermaNet® 3.0 a permis de réduire la mortalité à 37 %, qui a également diminué de manière significative à 20 % à 12 mois (p < 0,001).< 0,001), 16 % à 24 mois (p< 0,001), et 18 % à 36 mois (p< 0,001). Une tendance similaire a été observée avec Royal Guard®, la nouvelle prothèse entraînant une réduction de 33 % de la mortalité, suivie d'une réduction significative à 21 % à 12 mois (p < 0,001).< 0,001), 17 % à 24 mois (p< 0,001) et 15 % à 36 mois (p< 0,001).
Réduction de la fécondité des moustiques sauvages Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes pénétrant dans une hutte expérimentale à Kwa, au Bénin. Les données issues des groupes témoins non traités et des moustiquaires neuves ont été regroupées pour obtenir une estimation unique de l'efficacité. Les barres portant la même lettre ne présentent pas de différence significative au seuil de 5 % (p > 0,05) selon l'analyse de régression logistique. Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Les rapports de cotes décrivent la différence de fertilité entre les moustiquaires de nouvelle génération et les moustiquaires imprégnées uniquement de pyréthroïdes. La ligne pointillée représente un rapport de 1, indiquant l'absence de différence de fertilité.Une valeur inférieure à 1 indique une réduction plus importante de la fertilité avec les moustiquaires de nouvelle génération. Les données relatives aux moustiquaires de nouvelle génération ont été regroupées à partir de différents essais afin d'obtenir une estimation unique de leur efficacité. Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Date de publication : 17 février 2025