Une série d'essais pilotes en cabanes a été menée à Khowe, dans le sud du Bénin, afin d'évaluer l'efficacité biologique de moustiquaires de nouvelle génération, nouvelles et testées sur le terrain, contre les vecteurs du paludisme résistants aux pyréthrines. Les moustiquaires usagées sur le terrain ont été retirées des foyers après 12, 24 et 36 mois. La composition chimique de morceaux de toile découpés dans des MII entières a été analysée, et des bio-essais de sensibilité ont été réalisés lors de chaque essai afin d'évaluer l'évolution de la résistance aux insecticides au sein de la population de vecteurs de Khowe.
Interceptor® G2 a surpassé les autres moustiquaires imprégnées d'insecticide, confirmant la supériorité des moustiquaires aux pyréthroïdes et au chlorfénapyr sur les autres types de moustiquaires. Parmi les nouveaux produits, toutes les moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération ont démontré une meilleure bioefficacité qu'Interceptor® ; toutefois, l'ampleur de cette amélioration a été réduite après vieillissement sur le terrain en raison de la durabilité plus courte des composés non pyréthroïdes. Ces résultats soulignent la nécessité d'améliorer la persistance insecticide des moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération.
InsecticideFrançais Les moustiquaires imprégnées d'insecticide (MII) ont joué un rôle essentiel dans la réduction de la morbidité et de la mortalité liées au paludisme au cours des 20 dernières années. Depuis 2004, plus de 3 milliards de MII ont été distribuées dans le monde, et des études de modélisation suggèrent que 68 % des cas de paludisme en Afrique subsaharienne ont été évités entre 2000 et 2015. Malheureusement, la résistance des populations de vecteurs du paludisme aux pyréthroïdes (la classe standard d'insecticides utilisés dans les MII) a considérablement augmenté, menaçant l'efficacité de cette intervention essentielle. Dans le même temps, les progrès dans la lutte contre le paludisme ont ralenti à l'échelle mondiale, un certain nombre de pays fortement touchés connaissant une augmentation des cas de paludisme depuis 2015. Ces tendances ont conduit au développement d'une nouvelle génération de produits MII innovants visant à faire face à la menace de la résistance aux pyréthroïdes et à contribuer à réduire ce fardeau et à atteindre des objectifs mondiaux ambitieux.
Il existe actuellement trois moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération sur le marché, chacune associant un pyréthroïde à un autre insecticide ou synergiste capable de surmonter la résistance aux pyréthroïdes chez les vecteurs du paludisme. Ces dernières années, plusieurs essais contrôlés randomisés (ECR) en grappes ont été menés afin d'évaluer l'efficacité épidémiologique de ces moustiquaires par rapport aux moustiquaires standard contenant uniquement des pyréthroïdes et de fournir les preuves nécessaires pour étayer les recommandations de l'Organisation mondiale de la Santé (OMS). Les moustiquaires associant des pyréthroïdes au butoxyde de pipéronyle (PBO), un synergiste qui renforce l'efficacité des pyréthroïdes en inhibant les enzymes de détoxification des moustiques, ont été les premières à être recommandées par l'OMS après que deux produits (Olyset® Plus et PermaNet® 3.0) ont démontré un impact épidémiologique supérieur à celui des moustiquaires contenant uniquement des pyréthroïdes lors d'essais contrôlés randomisés en grappes en Tanzanie et en Ouganda. Cependant, davantage de données sont nécessaires pour déterminer la valeur pour la santé publique des moustiquaires à base de pyréthroïdes et de PBO en Afrique de l’Ouest, où une résistance sévère aux pyréthroïdes peut réduire leurs avantages par rapport aux moustiquaires à base de pyréthroïdes uniquement.
La persistance insecticide des moustiquaires imprégnées d'insecticide est généralement évaluée en collectant périodiquement des moustiquaires auprès des communautés et en les testant lors d'essais biologiques en laboratoire utilisant des souches de moustiques élevées par des insectes. Bien que ces essais soient utiles pour caractériser la biodisponibilité et l'efficacité des insecticides à la surface des moustiquaires au fil du temps, ils fournissent des informations limitées sur l'efficacité comparative des différents types de moustiquaires de nouvelle génération, car les méthodes et les souches de moustiques utilisées doivent être adaptées au mode d'action des insecticides qu'elles contiennent. Le test de la hutte expérimentale est une approche alternative qui peut être utilisée pour évaluer comparativement l'efficacité des moustiquaires imprégnées d'insecticide dans des études de durabilité dans des conditions qui imitent les interactions naturelles entre les moustiques sauvages hôtes et les moustiquaires domestiques pendant leur utilisation. En effet, des études de modélisation récentes utilisant des substituts entomologiques pour les données épidémiologiques ont montré que la mortalité des moustiques et les taux d'alimentation mesurés dans ces essais peuvent être utilisés pour prédire l'impact des moustiquaires imprégnées d'insecticide sur l'incidence et la prévalence du paludisme dans les ECR en grappes. Ainsi, les essais expérimentaux en cabane dans lesquels des ganglions lymphatiques traités à l'insecticide collectés sur le terrain sont inclus dans des ECR en grappes peuvent fournir des données précieuses sur la bioefficacité comparative et la persistance insecticide des ganglions lymphatiques traités à l'insecticide au cours de leur durée de vie prévue, et aider à interpréter les résultats épidémiologiques de ces études.
Le test de la cabane expérimentale est une simulation d'habitat humain standardisée recommandée par l'Organisation mondiale de la Santé pour évaluer l'efficacité des moustiquaires imprégnées d'insecticide. Ces tests reproduisent les conditions d'exposition réelles auxquelles les moustiques hôtes sont confrontés lorsqu'ils interagissent avec des moustiquaires domestiques et constituent donc une approche particulièrement adaptée pour évaluer l'efficacité biologique des moustiquaires usagées tout au long de leur durée de vie prévue.
Cette étude a évalué l'efficacité entomologique de trois types différents de moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération (PermaNet® 3.0, Royal Guard® et Interceptor® G2) en conditions réelles dans des granges expérimentales et les a comparées à une moustiquaire standard à base de pyréthrine seule (Interceptor®). Toutes ces moustiquaires imprégnées d'insecticide figurent sur la liste des produits préqualifiés de l'OMS pour la lutte antivectorielle. Les caractéristiques détaillées de chaque moustiquaire sont présentées ci-dessous :
Français En mars 2020, une campagne de distribution à grande échelle de moustiquaires vieillies sur le terrain a été menée dans les villages de cases de la préfecture du Zou, au sud du Bénin, pour des essais pilotes dans les cases. Les moustiquaires Interceptor®, Royal Guard® et Interceptor® G2 ont été sélectionnées dans des grappes sélectionnées au hasard dans les municipalités de Kove, Zagnanado et Ouinhi dans le cadre d'une étude observationnelle de durabilité imbriquée dans un ECR en grappes pour évaluer l'efficacité épidémiologique des moustiquaires de lit à double imprégnation d'insecticide. Des moustiquaires PermaNet® 3.0 ont été collectées dans le village d'Avokanzun près des communes de Jija et Bohicon (7°20′ N, 1°56′ E) et distribuées simultanément avec les moustiquaires en grappes de l'ECR lors de la campagne de masse de 2020 du Programme national de lutte contre le paludisme. La figure 1 montre les emplacements des grappes/villages d'étude où les différents types de MII ont été collectés par rapport aux sites de cabanes expérimentales.
Un essai pilote en cabane a été mené afin de comparer les performances entomologiques des MII Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® et Interceptor® G2 retirées des foyers 12, 24 et 36 mois après leur distribution. À chaque point annuel, les performances des MII usagées sur le terrain ont été comparées à celles de moustiquaires neuves et non utilisées de chaque type, ainsi qu'à celles de moustiquaires non traitées servant de témoin négatif. À chaque point annuel, 54 échantillons répétés de MII usagées sur le terrain et 6 MII neuves de chaque type ont été testés dans le cadre d'un ou deux essais répétés en cabane, avec une rotation quotidienne des traitements. Avant chaque essai en cabane, l'indice de porosité moyen des moustiquaires usagées de chaque type de MII a été mesuré conformément aux recommandations de l'OMS. Afin de simuler l'usure due à une utilisation quotidienne, toutes les MII neuves et les moustiquaires témoins non traitées ont été perforées de six trous de 4 x 4 cm : deux dans chaque panneau latéral long et un dans chaque panneau latéral court, conformément aux recommandations de l'OMS. La moustiquaire a été installée à l'intérieur de la cabane en attachant les bords des tôles du toit avec des cordes à des clous dans les angles supérieurs des murs. Les traitements suivants ont été évalués lors de chaque essai :
Les moustiquaires vieillies sur le terrain ont été évaluées dans des cabanes expérimentales l'année même de leur retrait. Des essais en cabane ont été menés sur le même site de mai à septembre 2021, d'avril à juin 2022 et de mai à juillet 2023, les moustiquaires ayant été retirées après respectivement 12, 24 et 36 mois. Chaque essai a duré un cycle de traitement complet (54 nuits sur 9 semaines), à l'exception de 12 mois, où deux cycles de traitement consécutifs ont été menés pour augmenter la taille de l'échantillon de moustiques. Suivant un plan en carré latin, les traitements ont été alternés chaque semaine entre les cabanes expérimentales afin de contrôler les effets de l'emplacement de la cabane, tandis que les volontaires ont été alternés quotidiennement afin de contrôler les différences d'attractivité des moustiques selon les hôtes. Les moustiques ont été collectés 6 jours par semaine ; le 7e jour, avant le cycle de rotation suivant, les cabanes ont été nettoyées et ventilées pour prévenir l'infestation.
Les principaux critères d'efficacité du traitement expérimental en hutte contre les moustiques Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes et la comparaison de la moustiquaire ITN de nouvelle génération avec la moustiquaire Interceptor® contenant uniquement des pyréthroïdes étaient les suivants :
Les critères d’efficacité secondaires du traitement expérimental en hutte contre les moustiques Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes étaient les suivants :
Confinement (%) – réduction du taux d'entrée dans le groupe traité par rapport au groupe non traité. Le calcul est le suivant :
où Tu est le nombre de moustiques inclus dans le groupe témoin non traité et Tt est le nombre de moustiques inclus dans le groupe traité.
Taux de désabonnement (%) – Taux de désabonnement dû à une irritation potentielle due au traitement, exprimé en proportion de moustiques collectés sur le balcon.
Le coefficient de suppression des moustiques hématophages (%) correspond à la réduction de la proportion de moustiques hématophages dans le groupe traité par rapport au groupe témoin non traité. Le calcul est le suivant : où Bfu est la proportion de moustiques hématophages dans le groupe témoin non traité et Bft la proportion de moustiques hématophages dans le groupe traité.
Réduction de la fertilité (%) : réduction de la proportion de moustiques fertiles dans le groupe traité par rapport au groupe témoin non traité. La méthode de calcul est la suivante : où Fu est la proportion de moustiques fertiles dans le groupe témoin non traité et Ft est la proportion de moustiques fertiles dans le groupe traité.
Français Pour suivre l'évolution du profil de résistance des populations de vecteurs Covè au fil du temps, l'OMS a réalisé des essais biologiques in vitro et en flacons la même année que chaque essai expérimental en cabane (2021, 2022, 2023) afin d'évaluer la sensibilité à l'IA dans les MII étudiées et d'éclairer l'interprétation des résultats. Dans les études in vitro, les moustiques ont été exposés à des papiers filtres traités avec des concentrations définies d'alpha-cyperméthrine (0,05 %) et de deltaméthrine (0,05 %), et à des bouteilles enduites de concentrations définies de CFP (100 μg/bouteille) et de PPF (100 μg/bouteille) pour évaluer la sensibilité à ces insecticides. L'intensité de la résistance aux pyréthroïdes a été étudiée en exposant les moustiques à des concentrations différentielles de 5 fois (0,25 %) et de 10 fois (0,50 %) d'α-cyperméthrine et de deltaméthrine. Enfin, la contribution de la synergie PBO et de la surexpression de la cytochrome P450 monooxygénase (P450) à la résistance aux pyréthroïdes a été évaluée en préexposant les moustiques à des concentrations différentielles d'α-cyperméthrine (0,05 %) et de deltaméthrine (0,05 %), et en préexposant au PBO (4 %). Le papier filtre utilisé pour le test en tube de l'OMS a été acheté auprès de l'Universiti Sains Malaysia. Les flacons de test de bio-essai de l'OMS utilisant CFP et PPF ont été préparés conformément aux recommandations de l'OMS.
Les moustiques utilisés pour les bio-essais ont été collectés au stade larvaire dans des sites de reproduction proches des cabanes expérimentales, puis élevés jusqu'à l'âge adulte. À chaque point temporel, au moins 100 moustiques ont été exposés à chaque traitement pendant 60 minutes, à raison de 4 réplicats par tube/bouteille et d'environ 25 moustiques par tube/bouteille. Pour les expositions aux pyréthroïdes et au CFP, des moustiques âgés de 3 à 5 jours et non nourris ont été utilisés, tandis que pour le PPF, des moustiques hématophages âgés de 5 à 7 jours ont été utilisés afin de stimuler l'ovogenèse et d'évaluer l'effet du PPF sur la reproduction des moustiques. Des expositions parallèles ont été réalisées en utilisant du papier filtre imprégné d'huile de silicone, du PBO pur (4 %) et des bouteilles enduites d'acétone comme témoins. À la fin de l'exposition, les moustiques ont été transférés dans des récipients non traités et exposés à du coton imbibé d'une solution de glucose à 10 % (p/v). Français La mortalité a été enregistrée 24 heures après l'exposition aux pyréthroïdes et toutes les 24 heures pendant 72 heures après l'exposition aux CFP et PPF. Pour évaluer la sensibilité au PPF, les moustiques survivants exposés au PPF et les témoins négatifs correspondants ont été disséqués après enregistrement de la mortalité différée, le développement ovarien a été observé à l'aide d'un microscope composé et la fertilité a été évaluée selon le stade de développement des œufs de Christophers [28, 30]. Si les œufs étaient complètement développés jusqu'au stade V de Christophers, les moustiques étaient classés comme fertiles, et si les œufs n'étaient pas complètement développés et restaient aux stades I à IV, les moustiques étaient classés comme stériles.
À chaque moment de l'année, des morceaux de 30 × 30 cm ont été découpés dans des filets neufs et vieillis sur le terrain, aux endroits spécifiés dans les recommandations de l'OMS [22]. Après découpe, les filets ont été étiquetés, enveloppés dans du papier aluminium et conservés au réfrigérateur à 4 ± 2 °C pour empêcher la migration de l'IA dans le tissu. Les filets ont ensuite été envoyés au Centre wallon de recherche agronomique en Belgique pour une analyse chimique afin de mesurer l'évolution de la teneur totale en IA au cours de leur durée de vie. Les méthodes d'analyse utilisées (basées sur les méthodes recommandées par le Comité coopératif international pour l'analyse des pesticides) ont été décrites précédemment [25, 31].
Français Pour les données de l'essai expérimental en cabane, le nombre total de moustiques vivants/morts, piqueurs/non piqueurs et fertiles/stériles dans les différents compartiments de la cabane a été additionné pour chaque traitement de chaque essai afin de calculer les différents résultats proportionnels (mortalité à 72 heures, piqûres, ectoparasitisme, piégeage par moustiquaire, fertilité) et leurs intervalles de confiance (IC) à 95 % correspondants. Les différences entre les traitements pour ces résultats binaires proportionnels ont été analysées par régression logistique, tandis que les différences pour les résultats de comptage ont été analysées par régression binomiale négative. Étant donné que deux cycles de rotation de traitement ont été effectués tous les 12 mois et que certains traitements ont été testés dans plusieurs essais, les analyses de pénétration des moustiques ont été ajustées en fonction du nombre de jours de test de chaque traitement. La nouvelle MII pour chaque résultat a également été analysée afin d'obtenir une estimation unique pour tous les points temporels. Outre la principale variable explicative du traitement, chaque modèle incluait la cabane, le dormeur, la période d'essai, l'indice d'ouverture de la MII et le jour comme effets fixes pour contrôler la variation due aux différences d'attractivité individuelle des dormeurs et des cabanes, à la saisonnalité, à l'état de la moustiquaire et à la dispersion excessive. Les analyses de régression ont produit des rapports de cotes ajustés (RC) et des intervalles de confiance à 95 % correspondants pour estimer l'effet de la MII de nouvelle génération par rapport à la moustiquaire Interceptor®, exclusivement composée de pyréthroïdes, sur les principaux critères de jugement : mortalité et fécondité des moustiques. Les valeurs de p des modèles ont également été utilisées pour attribuer des lettres compactes indiquant une signification statistique au seuil de 5 % pour toutes les comparaisons par paires des critères de jugement principaux et secondaires. Toutes les analyses de régression ont été réalisées dans Stata version 18.
La sensibilité des populations de vecteurs Covese a été interprétée en fonction de la mortalité et de la fécondité observées in vitro et des bio-essais en flacon, conformément aux recommandations de l'Organisation mondiale de la santé. Les résultats de l'analyse chimique ont fourni la teneur totale en IA des fragments de MII, qui a été utilisée pour calculer le taux de rétention d'IA dans les moustiquaires vieillies sur le terrain par rapport aux moustiquaires neuves à chaque point temporel chaque année. Toutes les données ont été enregistrées manuellement sur des formulaires standardisés, puis saisies deux fois dans une base de données Microsoft Excel.
Les comités d'éthique du ministère de la Santé du Bénin (n° 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), de la London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (n° 16237) et de l'Organisation mondiale de la Santé (n° ERC.0003153) ont approuvé la conduite d'un essai pilote en cabane impliquant des volontaires. Un consentement éclairé écrit a été obtenu de tous les volontaires avant leur participation à l'étude. Tous les volontaires ont reçu une chimioprophylaxie gratuite afin de réduire le risque de paludisme, et une infirmière était de garde tout au long de l'essai pour évaluer tout volontaire présentant des symptômes de fièvre ou une réaction indésirable au produit testé.
Les résultats complets des cabanes expérimentales, résumant le nombre total de moustiques vivants/morts, affamés/nourris de sang et fertiles/stériles pour chaque groupe expérimental, ainsi que des statistiques descriptives sont présentés comme matériel supplémentaire (tableau S1).
Dans une cabane expérimentale à Kowa, au Bénin, l'absorption de sang par des moustiques sauvages Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes a été supprimée. Les données des témoins non traités et des moustiquaires neuves ont été regroupées entre les essais afin d'obtenir une estimation unique de l'efficacité. Par analyse de régression logistique, les colonnes comportant des lettres communes n'étaient pas significativement différentes au seuil de 5 % (p > 0,05). Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Mortalité des moustiques sauvages Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes pénétrant dans une hutte expérimentale à Kowa, au Bénin. Les données des témoins non traités et des moustiquaires innovantes ont été regroupées entre les essais afin d'obtenir une estimation unique de l'efficacité. Par analyse de régression logistique, les colonnes comportant des lettres communes ne présentaient pas de différence significative au seuil de 5 % (p > 0,05). Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Le rapport de cotes décrit la différence de mortalité entre les moustiquaires de nouvelle génération et les moustiquaires contenant uniquement des pyréthroïdes. La ligne pointillée représente un rapport de cotes de 1, indiquant l'absence de différence de mortalité. Un rapport de cotes supérieur à 1 indique une mortalité plus élevée avec les moustiquaires de nouvelle génération. Les données relatives aux moustiquaires de nouvelle génération ont été regroupées entre les essais afin de produire une estimation unique de l'efficacité. Les barres d'erreur représentent les intervalles de confiance à 95 %.
Bien qu'Interceptor® ait affiché la mortalité la plus faible de toutes les moustiquaires imprégnées d'insecticide testées, le vieillissement sur le terrain n'a pas eu d'impact négatif sur la mortalité des vecteurs. En effet, la nouvelle moustiquaire Interceptor® a entraîné une mortalité de 12 %, tandis que les moustiquaires vieillies sur le terrain ont montré une légère amélioration à 12 mois (17 %, p = 0,006) et 24 mois (17 %, p = 0,004), avant de revenir à des niveaux similaires à ceux des nouvelles moustiquaires à 36 mois (11 %, p = 0,05). En revanche, les taux de mortalité des moustiquaires imprégnées d'insecticide de nouvelle génération ont progressivement diminué au fil du temps après leur déploiement. La réduction a été la plus prononcée avec Interceptor® G2, où la mortalité est passée de 58 % avec les nouvelles mailles à 36 % à 12 mois (p< 0,001), 31 % à 24 mois (p< 0,001) et 20 % à 36 mois (p< 0,001). Le nouveau PermaNet® 3.0 a entraîné une réduction de la mortalité à 37 %, qui a également diminué de manière significative à 20 % à 12 mois (p< 0,001), 16 % à 24 mois (p< 0,001) et 18 % à 36 mois (p< 0,001). Une tendance similaire a été observée avec Royal Guard®, la nouvelle maille entraînant une réduction de la mortalité de 33 %, suivie d'une réduction significative à 21 % à 12 mois (p< 0,001), 17 % à 24 mois (p< 0,001) et 15 % à 36 mois (p< 0,001).
Réduction de la fécondité des moustiques sauvages Anopheles gambiae résistants aux pyréthroïdes pénétrant dans une hutte expérimentale à Kwa, au Bénin. Les données des témoins non traités et des moustiquaires innovantes ont été regroupées entre les essais afin d'obtenir une estimation unique de l'efficacité. Les barres comportant des lettres communes ne présentaient pas de différence significative au seuil de 5 % (p > 0,05) par analyse de régression logistique. Les barres d'erreur représentent des intervalles de confiance à 95 %.
Les rapports de cotes décrivent la différence de fertilité entre les moustiquaires de nouvelle génération et les moustiquaires contenant uniquement des pyréthroïdes. La ligne pointillée représente un rapport de 1, indiquant l'absence de différence de fertilité. Rapports de cotes< 1 indique une réduction plus importante de la fertilité avec les moustiquaires de nouvelle génération. Les données relatives aux moustiquaires de nouvelle génération ont été regroupées entre les essais afin de produire une estimation unique de leur efficacité. Les barres d'erreur représentent des intervalles de confiance à 95 %.
Date de publication : 17 février 2025